Làm thế nào để bạn tìm thấy nồng độ của DNA từ độ hấp thụ?

2024 Tác giả: Miles Stephen | [email protected]. Sửa đổi lần cuối: 2023-12-15 23:42

Nồng độ DNA được ước tính bằng cách đo lường sự hấp thụ ở bước sóng 260nm, điều chỉnh A₂₆₀ đo độ đục (đo bằng sự hấp thụ ở bước sóng 320nm), nhân với hệ số pha loãng và sử dụng mối quan hệ mà A₂₆₀ của 1,0 = 50µg / ml dsDNA tinh khiết.

Tương tự như vậy, mọi người hỏi, làm thế nào để bạn tìm thấy nồng độ của DNA?

Để xác định nồng độ DNA trong mẫu ban đầu, hãy thực hiện phép tính sau:

1. Nồng độ dsDNA = 50 μg / mL × OD₂₆₀ × hệ số pha loãng.
2. Nồng độ dsDNA = 50 μg / mL × 0,65 × 50.
3. Nồng độ dsDNA = 1,63 mg / mL.

Ngoài ra, nồng độ DNA tốt là gì? MỘT tốt chất lượng DNA mẫu phải có A₂₆₀/MỘT₂₈₀ tỷ lệ 1,7-2,0 và điểm A₂₆₀/MỘT₂₃₀ tỷ lệ lớn hơn 1,5, nhưng vì độ nhạy của các kỹ thuật khác nhau đối với các chất gây ô nhiễm này khác nhau, các giá trị này chỉ nên được coi là hướng dẫn cho độ tinh khiết của mẫu của bạn.

Theo cách này, DNA có hấp thụ ở bước sóng 280 nm không?

Tỷ lệ độ hấp thụ ở 260 nm vs 280 nm là thường được sử dụng để đánh giá DNA nhiễm bẩn các dung dịch protein, vì protein (đặc biệt là các axit amin thơm) hấp thụ ánh sáng ở 280 nm.

Làm thế nào để bạn sử dụng NanoDrop cho nồng độ DNA?

Về cơ bản nanodrop cung cấp cho bạn tùy chọn để chọn DNA , ARN, Protein. Bạn cần phải chọn DNA , sau đó cho 2 ΜL nước (mili Q ưa thích) chọn "Trống" sau đó đổ thêm 2 ΜL nước nữa để xác nhận rằng số đo là 0. Sau đó đặt 2 ΜL mẫu của bạn. Bạn sẽ nhận được các phép đo.