Mục lục:

Làm thế nào để bạn tải một mẫu trong sắc ký cột?
Làm thế nào để bạn tải một mẫu trong sắc ký cột?

Video: Làm thế nào để bạn tải một mẫu trong sắc ký cột?

Video: Làm thế nào để bạn tải một mẫu trong sắc ký cột?
Video: PP NGHIÊN CỨU DƯỢC LIỆU - Buổi 2: SKLM - Sắc ký cột 2024, Tháng mười một
Anonim

Để tải cột:

  1. Làm tan biến mẫu vật trong lượng dung môi tối thiểu (5–10 giọt).
  2. Sử dụng một pipet hoặc ống tiêm có kim dày, nhỏ mẫu vật trực tiếp lên trên cùng của silica.
  3. Một khi toàn bộ mẫu vật đã được thêm vào, cho phép cột xả sao cho mức dung môi chạm vào đỉnh silica.

Về điều này, bạn sử dụng bao nhiêu silica trong một cột?

Phạm vi tốt là 100/20 đến 100/10 (5 đến 10 mL) chất rửa giải cho 100g silica . Nó không phải là một ý kiến hay sử dụng một dung môi khác ở đây - sự phân tách sẽ bị ảnh hưởng nghiêm trọng.

Thứ hai, sắc ký cột chớp hoạt động như thế nào? Sắc ký Flash . Lớp mỏng sắc ký được sử dụng để theo dõi phản ứng, kiểm tra độ tinh khiết của các hợp chất và để tối ưu hóa hỗn hợp dung môi cho sắc ký cột . Đây là một kỹ thuật vi mô đòi hỏi một lượng rất nhỏ hợp chất.

Ở đây, tại sao điều quan trọng là không để pha tĩnh bị khô khi chạy cột?

Nói cách khác, bùn bên trong cột không bao giờ được phép khô . Nếu điều này xảy ra, nó có thể tạo ra các vết nứt và không đồng đều trong chất rắn giai đoạn , điều này sẽ làm giảm hiệu quả của quá trình phân tách. Mẫu cần tách được nạp vào dung dịch trong dung môi thích hợp, tốt nhất là càng đậm đặc càng tốt.

Điều gì xảy ra nếu cột chạy khô?

Nếu như bạn để cột chạy khô silica sẽ bắt đầu nứt và bạn sẽ bị tách các hợp chất kém. Như bạn chạy NS cột , không bao giờ để mức dung môi thấp hơn mức của silica gel, nếu không bạn sẽ nhận được kết quả kém.

Đề xuất: