Làm thế nào để bạn tải điện di gel?

2024 Tác giả: Miles Stephen | [email protected]. Sửa đổi lần cuối: 2023-12-15 23:42

Nạp mẫu và chạy gel Agarose:

1. Thêm vào Đang tải đệm vào từng mẫu DNA của bạn.
2. Sau khi đông đặc, đặt agarose gel vào gel hộp ( điện di đơn vị).
3. Lấp đầy gel hộp có 1xTAE (hoặc TBE) cho đến khi gel được bảo hiểm.
4. Cẩn thận trọng tải một thang trọng lượng phân tử vào làn đầu tiên của gel .

Về vấn đề này, bạn cần nạp bao nhiêu DNA cho quá trình điện di trên gel?

Số lượng DNA để tải mỗi giếng có thể thay đổi. Số lượng ít nhất DNA có thể được phát hiện với ethidum bromide là 10 ng. DNA số lượng lên đến 100 ng mỗi giếng sẽ tạo ra một dải sạch, sắc nét trên một màu ethidium bromide gel.

Ngoài ra, tại sao đệm được sử dụng trong điện di trên gel thay vì nước? Các đệm là cần thiết để duy trì độ pH của dung dịch DNA ở gần mức trung tính vì nếu nó có thể trở thành axit thông qua quá trình điện phân. Dòng điện gây ra bởi các điện cực có thể gây ra nước phân tử để phân ly và giải phóng ion H +.

Mọi người cũng hỏi, tại sao một chất đánh dấu lại được sử dụng trong điện di trên gel?

Các mảnh nhỏ hơn di chuyển nhanh hơn và do đó xa hơn các mảnh lớn hơn khi chúng rắn qua gel . Tại sao một điểm đánh dấu được sử dụng khi chạy các mảnh vỡ qua gel ? MỘT đánh dấu chứa các đoạn DNA có kích thước đã biết. Điểm đánh dấu được chạy trong mọi gel để so sánh với các đoạn không xác định trong gel làn đường.

Có bao nhiêu DNA có thể được nhìn thấy trên gel agarose?

Phần lớn gel agarose được thực hiện từ 0,7% đến 2%. A 0,7% gel sẽ hiển thị phân tách tốt (độ phân giải) lớn DNA mảnh (5–10 kb) và 2% gel sẽ hiển thị độ phân giải tốt cho các mảnh nhỏ (0,2–1 kb).